1、關(guān)于氣相色譜使用注意事項(xiàng)

   為保證氣相色譜儀能夠正常運(yùn)行，確保分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、及時(shí)性，需要對(duì)氣相色譜儀進(jìn)行定期維護(hù)。 1、氣源檢查檢：查發(fā)生器或者氣體鋼瓶是否處于正常狀態(tài)；檢查脫水過(guò)濾器、活性炭以及脫氧過(guò)濾器，定期更換其中的填料。 2、管線泄漏：檢查定期檢查管線是否泄漏，可使用肥皂沫滴到接口處檢查。 3、氣化室的維護(hù)：氣化室包括：進(jìn)樣室螺帽、隔墊吹掃出口、載氣入口、分流氣出口、進(jìn)樣襯管。不同的部件有不同的維護(hù)方式： 小時(shí)，晾干后使用；若有損壞應(yīng)及時(shí)更換。 2）進(jìn)樣襯管必須定期進(jìn)行清洗，先用洗液清洗，然后用丙酮溶液浸泡，再用電吹風(fēng)吹干備用，及時(shí)添加石英棉。 4、若有損壞應(yīng)及時(shí)更換。 5、檢測(cè)器的維護(hù)：檢測(cè)器的收集器、檢測(cè)器接收塔、火焰噴嘴、檢測(cè)器基部、色譜柱螺帽等處，須用丙酮溶液清洗，一般超聲2小時(shí)，至清洗干凈，清洗后用電吹風(fēng)吹干備用。 6、柱溫箱的維護(hù)：柱溫箱的外殼、容積區(qū)間，可用脫脂棉蘸乙醇擦洗。 擴(kuò)展資料： 一、使用方法 氣相色譜儀的一般分析流程：載氣由高壓鋼瓶中流出，經(jīng)減壓閥降到所需壓力后，通過(guò)凈化干燥管使載氣凈化，再經(jīng)穩(wěn)壓閥和轉(zhuǎn)子流量計(jì)后，以穩(wěn)定的壓力、恒定的速度流經(jīng)氣化室與氣化的樣品混合，將樣品氣體代入色譜柱中進(jìn)行分離。 分離后的各組分隨著載氣先后流入檢測(cè)器，然后載氣放空。檢測(cè)器將物質(zhì)的濃度或質(zhì)量的變化轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ碾娦?，?jīng)放大后在記錄儀上記錄下來(lái)，就得到色譜流出曲線。根據(jù)色譜流出曲線上得到的每個(gè)峰的保留時(shí)間，可以進(jìn)行定性分析，根據(jù)峰面積或峰高的大小，可以進(jìn)行定量分析 二、應(yīng)用領(lǐng)域 氣相色譜法是以氣體為流動(dòng)相的色譜分析方法，主要用于分離分析易揮發(fā)的物質(zhì)。氣相色譜法已成為極為重要的分離分析方法之一，在醫(yī)藥衛(wèi)生、石油化工、環(huán)境監(jiān)測(cè)、生物化學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。 通常采用的檢測(cè)器有：熱導(dǎo)檢測(cè)器，火焰離子化檢測(cè)器，氦離子化檢測(cè)器，超聲波檢測(cè)器，光離子化檢測(cè)器，電子捕獲檢測(cè)器，火焰光度檢測(cè)器，電化學(xué)檢測(cè)器，質(zhì)譜檢測(cè)器等。 參考資料：百科氣相色譜儀 氣相色譜儀使用注意事項(xiàng) 一、進(jìn)樣應(yīng)注意問題 手不要拿注射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡(吸樣時(shí)要慢、快速排出再慢吸，反復(fù)幾次， ul 注射器 金屬針頭部分體積 ，有氣泡也看不到，多吸 ul 把注射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動(dòng)針桿排除氣泡，(指 ul 注射器，帶芯子注射器平感覺)進(jìn)樣速度要快(但不易特快)，每次進(jìn)樣保持相同速度，針尖到汽化室中部開始注射樣品。 二、安裝色譜柱 1. 安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。 2. 填充柱有卡套密封和墊片密封，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時(shí)不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片(島津色譜是墊片密封)。 3. 色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測(cè)器中。 4. 毛細(xì)管色譜柱安裝插入的長(zhǎng)度要根據(jù)儀器的說(shuō)明書而定，不同的色譜汽化室結(jié)構(gòu)不同，所以插進(jìn)的長(zhǎng)度也不同。需要說(shuō)明的如果你用毛細(xì)管色譜柱采用不分流，汽化室采用填充柱接口這時(shí)與汽化室連接毛細(xì)管柱不能探進(jìn)太多，略超出卡套即可。 三、氫氣和空氣的比例對(duì) FID 檢測(cè)器的影響 氫氣和空氣的比例應(yīng) 1 ： ，當(dāng)氫氣比例過(guò)大時(shí) FID 檢測(cè)器的靈敏度急劇下降，在使用色譜時(shí)別的條件不變的情況下，靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有一種氣體不足點(diǎn)火時(shí)發(fā)出“砰”的一聲，隨后就滅火，一般當(dāng)你點(diǎn)火電著就滅，再點(diǎn)還著隨后又滅是氫氣量不足。 四、使用 TCD 檢測(cè)器 1. 氫氣做載氣時(shí)尾氣一定要排到室外。 2. 氮?dú)庾鲚d氣橋流不能設(shè)大，比用氫氣時(shí)要小的多。 3. 沒通載氣不能給橋流，橋流要在儀器溫度穩(wěn)定后開始做樣前在給。 五、如何判斷 FID 檢測(cè)器是否點(diǎn)著火 不同的儀器判斷方法不同，有基流顯示的看基流大小，沒有基流顯示的用帶拋光面的扳手湊近檢測(cè)器出口，觀察其表面有無(wú)水汽凝結(jié) 。 六、如何判斷進(jìn)樣口密封墊是否該換 進(jìn)樣時(shí)感覺特別容易，用 TCD 檢測(cè)器不進(jìn)樣時(shí)記錄儀上有規(guī)則小峰出現(xiàn)，說(shuō)明密封墊漏氣該更換。更換密封墊不要擰的太緊，一般更換時(shí)都是在常溫，溫度升高后會(huì)更緊，密封墊擰的太緊會(huì)造成進(jìn)樣困難，常常會(huì)把注射器針頭弄彎。 七、如何選擇合適的密封墊 密封墊分一般密封墊和耐高溫密封墊，汽化室溫度超過(guò) ℃時(shí)用耐高溫密封墊，耐高溫密封墊的一面有一層膜，使用時(shí)帶膜的面朝下。 八、怎樣防止進(jìn)樣針不彎 很多做色譜分析工作的新手常常會(huì)把注射器的針頭和注射器桿弄彎，原因是： 1. 進(jìn)樣口擰的太緊，室溫下擰的太緊當(dāng)汽化室溫度升高時(shí)硅膠密封墊膨脹后會(huì)更緊，這時(shí)注射器很難扎進(jìn)去。 2. 位置找不好針扎在進(jìn)樣口金屬部位。 3. 注射器桿彎是進(jìn)樣時(shí)用力太猛，進(jìn)口色譜帶一個(gè)進(jìn)樣器架，用進(jìn)樣器架進(jìn)樣就不會(huì)把注射器桿弄彎。 4. 因?yàn)樽⑸淦鲀?nèi)壁有污染，注射時(shí)將針桿推彎。注射器用一段時(shí)間就會(huì)發(fā)現(xiàn)針管內(nèi)靠近頂部有一小段黑的東西，這時(shí)吸樣注射感到吃力。清洗方法將針桿拔出，注入一點(diǎn)水，將針桿插到有污染的位置反復(fù)推拉，一次不行再注入水直到將污染物弄掉，這時(shí)你會(huì)看到注射器內(nèi)的水變的渾濁，將針桿拔出用濾紙擦一下，再用酒精洗幾次。分析的樣品為溶劑溶解的固體樣時(shí)，進(jìn)完樣要及時(shí)用溶劑洗注射器。 5. 進(jìn)樣時(shí)一定要穩(wěn)重，急于快會(huì)把注射器弄彎的，只要你進(jìn)樣熟練了自然就快了。 氣相色譜使用注意事項(xiàng) 進(jìn)樣應(yīng)注意問題 手不要拿注射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡（吸樣時(shí)要慢、快速排出再慢吸，反復(fù)幾次，，有氣泡也看不到，多吸ul把注射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動(dòng)針桿排除氣泡，（指μl注射器，帶芯子注射器平感覺）進(jìn)樣速度要快（但不易特快），每次進(jìn)樣保持相同速度，針尖到汽化室中部開始注射樣品。 安裝色譜柱 。 ，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時(shí)不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片（島津色譜是墊片密封）。 。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測(cè)器中。 4. 毛細(xì)管色譜柱 安裝插入的長(zhǎng)度要根據(jù)儀器的說(shuō)明書而定，不同的色譜汽化室結(jié)構(gòu)不同，所以插進(jìn)的長(zhǎng)度也不同。需要說(shuō)明的如果你用 毛細(xì)管色譜柱 采用不分流，汽化室采用填充柱接口這時(shí)與汽化室連接毛細(xì)管柱不能探進(jìn)太多，略超出卡套即可。 氫氣和空氣的比例對(duì)FID檢測(cè)器的影響 氫氣和空氣的比例應(yīng)1：，當(dāng)氫氣比例過(guò)大時(shí)FID檢測(cè)器的靈敏度急劇下降，在使用色譜時(shí)別的條件不變的情況下，靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有一種氣體不足點(diǎn)火時(shí)發(fā)出“砰”的一聲，隨后就滅火，一般當(dāng)你點(diǎn)火電著就滅，再點(diǎn)還著隨后又滅是氫氣量不足。 使用TCD檢測(cè)器 。 ，比用氫氣時(shí)要小的多。 ，橋流要在儀器溫度穩(wěn)定后開始做樣前在給。 如何判斷FID檢測(cè)器是否點(diǎn)著火 不同的儀器判斷方法不同，有基流顯示的看基流大小，沒有基流顯示的用帶拋光面的扳手湊近檢測(cè)器出口，觀察其表面有無(wú)水汽凝結(jié) 。 如何判斷進(jìn)樣口密封墊是否該換 進(jìn)樣時(shí)感覺特別容易，用TCD檢測(cè)器不進(jìn)樣時(shí)記錄儀上有規(guī)則小峰出現(xiàn)，說(shuō)明密封墊漏氣該更換。更換密封墊不要擰的太緊，一般更換時(shí)都是在常溫，溫度升高后會(huì)更緊，密封墊擰的太緊會(huì)造成進(jìn)樣困難，常常會(huì)把注射器針頭弄彎。 如何選擇合適的密封墊 密封墊分一般密封墊和耐高溫密封墊，汽化室溫度超過(guò)℃時(shí)用耐高溫密封墊，耐高溫密封墊的一面有一層膜，使用時(shí)帶膜的面朝下。 怎樣防止進(jìn)樣針不彎 很多做色譜分析工作的新手常常會(huì)把注射器的針頭和注射器桿弄彎，原因是： ，室溫下擰的太緊當(dāng)汽化室溫度升高時(shí)硅膠密封墊膨脹后會(huì)更緊，這時(shí)注射器很難扎進(jìn)去。 。 ，進(jìn)口色譜帶一個(gè)進(jìn)樣器架，用進(jìn)樣器架進(jìn)樣就不會(huì)把注射器桿弄彎。 ，注射時(shí)將針桿推彎。注射器用一段時(shí)間就會(huì)發(fā)現(xiàn)針管內(nèi)靠近頂部有一小段黑的東西，這時(shí)吸樣注射感到吃力。清洗方法將針桿拔出，注入一點(diǎn)水，將針桿插到有污染的位置反復(fù)推拉，一次不行再注入水直到將污染物弄掉，這時(shí)你會(huì)看到注射器內(nèi)的水變的渾濁，將針桿拔出用濾紙擦一下，再用酒精洗幾次。分析的樣品為溶劑溶解的固體樣時(shí)，進(jìn)完樣要及時(shí)用溶劑洗注射器。 ，急于快會(huì)把注射器弄彎的，只要你進(jìn)樣熟練了自然就快了。 提高分離度的幾種方法 1．增加柱長(zhǎng)可以增加分離度． 2．減少進(jìn)樣量（固體樣品加大溶劑量）． ． 4．降低載氣流速． 5．降低色譜柱溫度． 6．提高汽化室溫度． 7．減少系統(tǒng)的死體積，主要是色譜柱連接要插到位，不分流進(jìn)樣要選擇不分流結(jié)構(gòu)汽化室。 8． 毛細(xì)管色譜柱 要分流，選擇合適的分流比． 綜上所訴要根據(jù)具體情況在實(shí)驗(yàn)中摸索，比如降低載氣流速、降低色譜柱溫度又會(huì)使色譜峰變寬，因此要看色譜峰型來(lái)改變條件。最終目的是達(dá)到分離好，出峰時(shí)間快。 氣相色譜 柱的安裝 色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其最佳的性能和延長(zhǎng)使用壽命。 正確的安裝請(qǐng)參考以下步驟： 步驟1. 檢查氣體過(guò)濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊，保證輔助氣和檢測(cè)器的用氣暢通有效。如果以前做過(guò)較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。 步驟2. 將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平 步驟cm，這就是較為理想的狀態(tài)。（具體的插入程度和方法參見所使用GC的隨機(jī)手冊(cè)）避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱，并小心不要讓標(biāo)記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)柱接觸摩擦，以防柱身斷裂受損。將色譜柱正確插入進(jìn)樣口后，用手把連接螺母擰上，擰緊后（用手?jǐn)Q不動(dòng)了）用扳手再多擰/2圈，保證安裝的密封程度。因?yàn)椴痪o密的安裝，不僅會(huì)引起裝置的泄漏，而且有可能對(duì)色譜柱造成永久損壞。 步驟4. 接通載氣當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后，通載氣, 調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速（見下表）。 柱前壓設(shè)置為Psi m m m (以上僅為建議的起始設(shè)置，具體數(shù)值要依據(jù)實(shí)際的載氣流速。)將色譜柱的出口端插入裝有己烷的樣品瓶中，正常情況下，我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡，就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否正確設(shè)置，并檢查一下整個(gè)氣路有無(wú)泄漏。等所有問題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無(wú)溶劑殘留，再進(jìn)行下一步的安裝。 步驟5. 將色譜柱連接于檢測(cè)器上其安裝和所需注意的事項(xiàng)與色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時(shí)，應(yīng)該將柱子與檢測(cè)器斷開，這樣檢測(cè)器可能會(huì)更快達(dá)到穩(wěn)定。 步驟6. 確定載氣流量，再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查注意：如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱，會(huì)快速且永久性的損壞色譜柱。 步驟7. 色譜柱的老化色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后，就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化了。 對(duì)色譜柱升至一恒定溫度，通常為其溫度上限。特殊情況下，可加熱至高于最高使用溫度小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定或在℃以下，盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題。如果還是繼續(xù)的老化，不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。 一般來(lái)說(shuō)，涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間長(zhǎng)，而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同。PLOT柱的老化步驟:HLZ Pora 系列 ℃ 小時(shí)Alumina(氧化鋁) 小時(shí)以上由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附，使得這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移。 當(dāng)柱子分離過(guò)含有高水分樣品后，需要將色譜柱重新老化，以除去固定相中吸附的水分。 步驟cm/sec載氣雜質(zhì)過(guò)濾器在載氣的管線中加入氣體過(guò)濾裝置不僅可以延長(zhǎng)色譜柱壽命，而且很大程度的降低了背景噪音。建議最好安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時(shí)，最好能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。 步驟℃升至最高使用溫度，達(dá)到最高使用溫度后保持min。這樣我們就會(huì)的到一張流失圖。這些數(shù)值可能對(duì)今后作對(duì)比試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)問題的解決有幫助。在空白試驗(yàn)的色譜圖中，不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn)。如果出現(xiàn)了色譜峰，通?？赡苁菑倪M(jìn)樣口帶來(lái)的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下，色譜柱的性能開始下降，基線的信值會(huì)增高。另外，如果在很低的溫度下，基線信值明顯的大于初始值，那么有可能是色譜柱和 GC系統(tǒng)有污染。其他：色譜柱的保存用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。在安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分，保證沒有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小? 注意：當(dāng)空氣中氫氣的含量在4%時(shí)，就有爆炸的危險(xiǎn)。所以一定要保證實(shí)驗(yàn)室有良好的通風(fēng)系統(tǒng)。 還可以用在海關(guān)檢驗(yàn)檢疫，化育賽事的興奮劑檢測(cè)，及總裁部門，科研單位，大學(xué)院校等 一、進(jìn)樣應(yīng)注意問題 手不要拿注射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡（吸樣時(shí)要慢、快速排出再慢吸，反復(fù)幾次， ul 注射器 金屬針頭部分體積 ，有氣泡也看不到，多吸 ul 把注射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動(dòng)針桿排除氣泡，（指 ul 注射器，帶芯子注射器平感覺）進(jìn)樣速度要快（但不易特快），每次進(jìn)樣保持相同速度，針尖到汽化室中部開始注射樣品。 二、安裝色譜柱 1. 安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。 2. 填充柱有卡套密封和墊片密封，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時(shí)不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片（島津色譜是墊片密封）。 3. 色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測(cè)器中。 4. 毛細(xì)管色譜柱安裝插入的長(zhǎng)度要根據(jù)儀器的說(shuō)明書而定，不同的色譜汽化室結(jié)構(gòu)不同，所以插進(jìn)的長(zhǎng)度也不同。需要說(shuō)明的如果你用毛細(xì)管色譜柱采用不分流，汽化室采用填充柱接口這時(shí)與汽化室連接毛細(xì)管柱不能探進(jìn)太多，略超出卡套即可。 三、氫氣和空氣的比例對(duì) FID 檢測(cè)器的影響 氫氣和空氣的比例應(yīng) 1 ： ，當(dāng)氫氣比例過(guò)大時(shí) FID 檢測(cè)器的靈敏度急劇下降，在使用色譜時(shí)別的條件不變的情況下，靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣有一種氣體不足點(diǎn)火時(shí)發(fā)出“砰”的一聲，隨后就滅火，一般當(dāng)你點(diǎn)火電著就滅，再點(diǎn)還著隨后又滅是氫氣量不足。 四、使用 TCD 檢測(cè)器 1. 氫氣做載氣時(shí)尾氣一定要排到室外。 2. 氮?dú)庾鲚d氣橋流不能設(shè)大，比用氫氣時(shí)要小的多。 3. 沒通載氣不能給橋流，橋流要在儀器溫度穩(wěn)定后開始做樣前在給。

2、氣相色譜的玻璃襯管起什么作用?

   玻璃襯管是氣化室的一部分，進(jìn)樣的物質(zhì)要在這里加熱氣化。 襯管的作用就是加速物質(zhì)氣化，防止未氣化的雜質(zhì)沾到加熱器上，防止雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱。 所以會(huì)有雜質(zhì)沾在襯管上。 襯管臟了就洗或換新的，樣品也要盡量用干凈的或過(guò)濾過(guò)。 玻璃襯管是這樣安裝的 如果您對(duì)我的回答滿意，請(qǐng)及時(shí)，！

3、氣相色譜儀襯管臟了會(huì)有什么影響

   會(huì)出現(xiàn)毛刺峰、分岔峰、鬼峰。 你上“色譜世界”上問問看看吧。這是個(gè)非常專業(yè)的網(wǎng)站，對(duì)你會(huì)有很大幫助的。

4、紫外可見分光度計(jì) 基線平坦度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響

   紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定的是蛋白濃度,x射線晶體衍射測(cè)的才是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。紫外分光光度計(jì)測(cè)蛋白濃度原理:組成蛋白質(zhì)的氨基酸里,有三種氨基酸:苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸具有苯環(huán)的共軛結(jié)構(gòu),它們對(duì)特定波長(zhǎng)的紫外線具有吸收光譜,也就是說(shuō):它們對(duì)紫外線是有顏色的。每種蛋白質(zhì)根據(jù)苯環(huán)的數(shù)量和分布都有一定的吸收強(qiáng)度,總的吸收值和分子的濃度呈正比。根據(jù)蛋白質(zhì)溶液對(duì)nm紫外線的吸收強(qiáng)度,可以測(cè)定出蛋白質(zhì)的濃度。x射線晶體衍射測(cè)蛋白結(jié)構(gòu)原理:蛋白質(zhì)的肽鏈不是雜亂無(wú)章的,按照一定的規(guī)則盤曲成了特定的形狀(蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)),每個(gè)碳碳鍵都有它特定的構(gòu)象,這種特定的結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)作為分子機(jī)器的基礎(chǔ)。結(jié)晶的蛋白質(zhì)中,分子排成了空間重復(fù)的有序的結(jié)構(gòu),而原子之間的間隙與x射線的波長(zhǎng)類似,構(gòu)成了x射線的衍射光柵。當(dāng)用x射線照射這種重復(fù)性的天然光柵時(shí),通過(guò)波的衍射形成了有規(guī)則的干涉條紋,分析這些條紋就可以解析出蛋白質(zhì)分子中每個(gè)原子的位置。 哦 紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定的是蛋白濃度,x射線晶體衍射測(cè)的才是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。紫外分光光度計(jì)測(cè)蛋白濃度原理:組成蛋白質(zhì)的氨基酸里,有三種氨基酸:苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸具有苯環(huán)的共軛結(jié)構(gòu),它們對(duì)特定波長(zhǎng)的紫外線具有吸收光譜,也就是說(shuō):它們對(duì)紫外線是有顏色的。每種蛋白質(zhì)根據(jù)苯環(huán)的數(shù)量和分布都有一定的吸收強(qiáng)度,總的吸收值和分子的濃度呈正比。根據(jù)蛋白質(zhì)溶液對(duì)nm紫外線的吸收強(qiáng)度,可以測(cè)定出蛋白質(zhì)的濃度。x射線晶體衍射測(cè)蛋白結(jié)構(gòu)原理:蛋白質(zhì)的肽鏈不是雜亂無(wú)章的,按照一定的規(guī)則盤曲成了特定的形狀(蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)),每個(gè)碳碳鍵都有它特定的構(gòu)象,這種特定的結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)作為分子機(jī)器的基礎(chǔ)。結(jié)晶的蛋白質(zhì)中,分子排成了空間重復(fù)的有序的結(jié)構(gòu),而原子之間的間隙與x射線的波長(zhǎng)類似,構(gòu)成了x射線的衍射光柵。當(dāng)用x射線照射這種重復(fù)性的天然光柵時(shí),通過(guò)波的衍射形成了有規(guī)則的干涉條紋,分析這些條紋就可以解析出蛋白質(zhì)分子中每個(gè)原子的位置。 哦 用于紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試的材料, 應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中最主要的是鉻酸鉀( K Cr. 溶液經(jīng)常被使用。